24. Применяемые реактивы
а) Тиаминхлорид-гидрохлорид 100%-ной чистоты с температурой плавления 246-250 °С. Если нужно, его перекристаллизовывают 2 раза из 80%-ного этилового спирта, высушивают в вакуум-эксикаторе над серной кислотой и хранят в эксикаторе, в темноте.
б) Красная кровяная соль. После перекристаллизации из дистиллированной воды из нее перед анализом приготовляют 1%-ный водный раствор.
в) Натр едкий х.ч. 30%-ный водный раствор; 15%-ный водный раствор.
г) Окислительная смесь: перед анализом смешивают 4 см 1%-ного раствора красной кровяной соли с 96 см 15%-ного раствора едкого натра.
д) Изобутиловый спирт с температурой кипения 107-108 °С, изоамиловый спирт с температурой кипения 130 °С или бутиловый спирт с температурой кипения 117 °С (употребляется любой из указанных спиртов).
е) Этиловый спирт, ректификованный 96%-ный.
Примечание. В случае наличия флуоресценции спирты перед употреблением подвергают очистке: к 1 дм спирта прибавляют 15-20 г активированного угля, встряхивают 15 мин, оставляют на сутки, повторяя несколько раз встряхивание. Декантируют, фильтруют, высушивают над хлористым кальцием и перегоняют при соответствующей температуре (перегонку изобутилового, изоамилового и бутилового спирта ведут на глицериновой или песчаной бане, а этилового - на водяной бане).
ж) Натрий сернокислый безводный, прокаленный.
з) Калий марганцовокислый, х.ч.
и) Серебро азотнокислое, 10%-ный раствор.
Все применяемые реактивы должны соответствовать требованиям действующих стандартов или технических условий.
25. Необходимая аппаратура
Флуороскоп: ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4, помещенная в кожух с черным никелевым светофильтром с набором пробирок одинакового диаметра из однородного нефлуоресцирующего стекла.
26. Описание определения
Флуороскопический визуальный метод
Приготовление шкалы стандартных растворов
100 мг чистого кристаллического тиаминхлорида-гидрохлорида растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе, вместимостью 1 дм. Раствор хранят в склянке темного стекла с притертой пробкой на холоде не более 1 мес. Из этого раствора приготовляют путем разведения стандартные рабочие растворы в мерных колбах вместимостью 100 см по табл.3.
Таблица 3
Номер стандартного раствора | Количество основного раствора, см | Количество добавленной воды, см | Содержание витамина (тиаминхлорид-гидрохлорида) в 1 см полученного стандартного раствора, г |
1 | 0,1 | до 100 | 0,1 |
2 | 0,2 | " 100 | 0,2 |
3 | 0,3 | " 100 | 0,3 |
4 | 0,4 | " 100 | 0,4 |
5 | 0,5 | " 100 | 0,5 |
6 | 0,6 | " 100 | 0,6 |
7 | 0,7 | " 100 | 0,7 |
8 | 0,8 | " 100 | 0,8 |
9 | 0,9 | " 100 | 0,9 |
10 | 1,0 | " 100 | 1,0 |
11 | 1,2 | " 100 | 1,2 |
12 | 1,4 | " 100 | 1,4 |
13 | 1,6 | " 100 | 1,6 |
14 | 1,8 | " 100 | 1,8 |
15 | 2,0 | " 100 | 2,0 |
Из каждого рабочего стандартного раствора отбирают по 1 см в капельные или делительные воронки вместимостью 50 см или в цилиндры с притертой пробкой и добавляют при помощи градуированных пипеток по 4 см дистиллированной воды, по 3 см окислительной смеси, сильно встряхивают, прибавляют 12 см изобутилового или другого рекомендованного спирта из бюретки и встряхивают в течение 2 мин. После разделения водной и спиртовой фаз, водную нижнюю фазу удаляют, а в спиртовую фазу добавляют около 0,5 г сернокислого натрия или 2 см этилового спирта. После перемешивания и отстаивания отбирают 10 см этого раствора и переносят в пробирку для последующего определения флуоресценции. Пробирку закрывают корковой пробкой и сохраняют в темноте.
Примечание. Стандартные растворы тиохрома могут храниться в темноте на холоде в течение двух дней.
Определение в кристаллическом препарате, в драже и таблетках
При анализе витаминных препаратов (кристаллический витамин , драже и таблетки) вначале необходимо выяснить природу галоида, входящего в состав молекулы витамина; для этого проводят качественную реакцию на ионы брома и хлора с раствором азотнокислого серебра; при наличии хлорида выпадает белый, при наличии бромида - желтоватый осадок.