ГОСТ 29311-92 Гидролизаты панкреатические для бактериальных питательных сред. Общие технические условия

4. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

4.1. Определение внешнего вида и цвета

Внешний вид: наличие механической примеси, плесени, хлопьев, осадка устанавливают, просматривая флаконы с гидролизатом в проходящем свете, для чего флаконы встряхивают и переворачивают пробками вниз.

Цвет определяют визуально на белом фоне.

4.2. Определение общего азота - по ГОСТ 20730 или по методу Несслера.

4.2.1. Определение общего азота по методу Несслера

Сущность метода заключается в том, что получаемый в результате минерализации вещества сульфат аммония расщепляется в щелочной среде до аммиака. При рН 12 аммиак вступает в реакцию с реактивом Несслера. При этом образуется комплексное соединение ртути желто-оранжевого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации аммиака и может быть измерена колориметрически.

4.2.1.1. Аппаратура и реактивы

Фотоэлектроколориметр.

Пипетки по ГОСТ 29227.

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328, 10%-ный раствор.

Реактив Несслера по ТУ 6-09-20.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

4.2.1.2. Подготовка к испытанию

Построение калибровочной кривой

   Готовят стандартный раствор сернокислого аммония, 1 см которого содержит 0,1 мкг азота: 0,4716 г аммония сернокислого ос.ч. или х.ч. растворяют в 1 дм дистиллированной воды. В мерные колбы вместимостью 50 см вносят 0,5-1,0-1,5-2,0-2,5-3,0 см стандартного раствора, что соответствует 0,1-0,2-0,3-0,4-0,5-0,6 миллиграмм-процента азота. Добавляют до объема колбы дистиллированную воду, вносят 2,5 см реактива Несслера, доводят водой до метки и перемешивают.

Измеряют на фотоэлектроколориметре при 440 нм (синий светофильтр) в кюветах с толщиной поглощающего свет слоя 1 см против кюветы с контрольным раствором (9,5 см воды плюс 0,5 см реактива Несслера).

4.2.1.3. Проведение испытания

Для минерализации в колбу Кьельдаля берут 0,5 см предварительно профильтрованного гидролизата и 1,0 см серной кислоты. Минерализат переносят в мерную колбу вместимостью 100 см, многократно обмывая колбу Кьельдаля. Раствор доводят водой до метки и тщательно перемешивают.

В пробирку отбирают 0,5 см раствора, добавляют 0,1 см гидроксида натрия, перемешивают, добавляют 8,9 см воды и 0,5 см реактива Несслера.

В качестве оптического контроля используют образец, состоящий из 9,5 см воды и 0,5 см реактива Несслера.

Пробы тщательно перемешивают и через 2 мин колориметрируют при 440 нм (синий светофильтр) в кюветах с толщиной поглощающего свет слоя 1 см.

4.2.1.4. Обработка результатов

Массу общего азота () в процентах вычисляют по формуле      

,

где   - масса азота, определенная по стандартной кривой, мг/%;

100 - коэффициент пересчета для первого разведения;