ГОСТ Р 53400-2009 (ИСО 7937:2004) Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Метод подсчета колоний Clostridium perfringens
5 Разведение, питательные среды и реактивы*
_______________
* В бумажном оригинале в наименовании раздела 5 слова "Разведение, питательные среды" выделеы курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.
В лабораторной практике используют ГОСТ Р ИСО 7218, ГОСТ Р 51448, ГОСТ Р ИСО 11133-1 и ГОСТ Р ИСО 11133-2 для приготовления, производства, проверки и применения питательных сред.
5.1 Разведения
В общем случае разведения по ГОСТ Р ИСО 7218.
5.2 Сульфит-циклосериновый агар (SC)
5.2.1 Состав в соответствии с таблицей 1.
Таблица 1
Состав | Значение показателя |
Ферментативный белковый гидролизат, г | 15,0 |
Ферментативный соевый гидролизат, г | 5,0 |
Дрожжевой экстракт, г | 5,0 |
Двунатрий дисульфит безводный (Na | 1,0 |
Железо (III) - аммония цитрат*, г | 1,0 |
Агар, г | От 9,0 до 18,0** |
Вода, см | 1000 |
* Реактив должен содержать не менее 15% железа (массовая доля). ** В зависимости от гелеобразующей способности агара. | |
5.2.1.1 Приготовление среды
Растворяют компоненты среды в горячей воде и доводят до кипения. Устанавливают уровень рН, чтобы после стерилизации он соответствовал (7,6±0,2) при 25 °С.
Разливают среду во флаконы или бутылки соответствующей емкости.
Стерилизуют в автоклаве (см. 6.1) 15 мин при 121 °С.
Хранят в холодильнике при температуре (5±3) °С не более двух недель после приготовления.
5.2.2 Раствор D-циклосерина
5.2.2.1 Состав в соответствии с таблицей 2.
Таблица 2
Состав | Значение показателя |
D-циклосерин*, г | 4,0 |
Вода, см | 100 |
* Используется белый кристаллический порошок. | |
5.2.2.2 Приготовление среды
Растворяют D-циклосерин в воде и стерилизуют.
Среду хранят в холодильнике при температуре (3±2) °С не более четырех недель после приготовления.
5.2.3 Полная среда
Непосредственно перед посевом чашечным методом (см. 9.2) добавляют 1 см раствора D-циклосерина (см. 5.2.2) к каждой порции стерильной расплавленной основы среды объемом 100 см
(см. 5.3.1), охлажденной до 44 °С - 47 °С.