ГОСТ Р 53093-2008 Зерно и продукты его переработки, комбикорма. Определение содержания зеараленона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

     6 Подготовка к проведению испытаний

6.1 Подготовка стеклянной посуды

Посуду для приготовления и хранения подвижной фазы моют только серной кислотой (без применения других моющих средств), тщательно промывают водопроводной водой и ополаскивают дистиллированной водой.

Остальную стеклянную посуду моют горячей водой с моющим средством и тщательно ополаскивают дистиллированной водой. Посуду сушат в сушильном шкафу не менее 3 ч.

6.2 Приготовление вспомогательных растворов

6.2.1 Приготовление подвижной фазы (смесь ацетонитрил - вода в объемном соотношении 50:50)

Подвижную фазу готовят смешением равных объемов ацетонитрила и дистиллированной воды. Смесь тщательно перемешивают. Хранят подвижную фазу в стеклянном сосуде с пришлифованной или полиэтиленовой пробкой. Недопустим контакт подвижной фазы с резиной. Срок хранения - не более 1 мес.

6.2.2 Приготовление раствора гидроксида натрия массовой концентрации 40 мг/дм

В мерную колбу вместимостью 500 см помещают от 200 до 300 см дистиллированной воды, 20 г гидроксида натрия, тщательно перемешивают. По окончании растворения доводят дистиллированной водой до метки. Срок хранения в сосуде из полиэтилена с плотно завинчивающейся крышкой - не более 2 мес.

6.2.3 Приготовление раствора ортофосфорной кислоты объемной доли 4,6%

В мерную колбу вместимостью 200 см помещают 100 см дистиллированной воды, 9,2 см концентрированной ортофосфорной кислоты, тщательно перемешивают, доводят до метки дистиллированной водой и снова тщательно перемешивают. Срок хранения не ограничен.

6.3 Приготовление растворов зеараленона

Растворы зеараленона должны храниться в темноте при температуре не выше 6 °С в стеклянных или фторопластовых сосудах, исключающих возможность испарения растворителя.

6.3.1 Приготовление исходного раствора зеараленона номинального значения массовой концентрации 1 мкг/см

Пипеткой отбирают 1 см стандартного образца состава раствора зеараленона в ацетонитриле номинального значения массовой концентрации 100 мкг/см, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см и доводят до метки ацетонитрилом.

Действительное значение массовой концентрации зеараленона в исходном растворе , мкг/см, вычисляют по формуле:

,                                                      (1)

где - действительное значение массовой концентрации зеараленона в стандартном образце, мкг/см;

- объем стандартного образца, взятый для приготовления раствора (1 см);

- объем приготовленного раствора (100 см).

Срок хранения раствора - не более 6 мес в холодильнике.

6.3.2 Приготовление градуировочных растворов зеараленона

Исходный раствор зеараленона в ацетонитриле по 6.3.1 помещают в колбу для упаривания. Объем раствора зеараленона должен соответствовать требованиям таблицы 1. Удаляют растворитель упариванием в токе азота или в вакууме при температуре от 40 °С до 45 °С. Полученный сухой остаток растворяют в подвижной фазе по 6.2.1 в соответствии с таблицей 1. Срок хранения градуировочных растворов - не более 24 ч.

Таблица 1

Действительное значение массовой концентрации градуировочного раствора , мкг/см, вычисляют по формуле: