Энзиматическое агар-диффузное определение фосфорорганических инсектицидов в продуктах животного происхождения

Принцип метода. В основу метода* положен принцип количественного определения антибиотиков, модифицированный Санди для определения остатков фосфорорганических пестицидов в растениях. Фосфорорганические пестициды диффундируют в содержащий холинэстеразу слой агара и угнетают фермент. Затем слой с агаром обрабатывают ацетилхолином, при энзиматическом расщеплении которого образуется уксусная кислота. Она изменяет окраску содержащегося в агаре индикатора - бромтимолового синего. Диаметры или площади участков агара с измененной окраской зависят от концентрации инсектицида в растворе. Сильные ингибиторы холинэстеразы могут быть определены сразу, а слабые (эфиры тио- и дитиофосфорной кислот) - после активации.

________________

* А.А.Непоклонов, В.К.Метелица (ВНИИВС).

Реактивы и растворы

Хлороформ

Спирт этиловый 96°-ный

Ацетон, ч.д.а.

Агар

Бромтимоловый синий (индикатор)

Едкий натр

Нормальная лошадиная сыворотка

Насыщенный водный раствор брома

0,1 М раствор тиосульфата натрия

Ацетилхолин

Индикаторная бумага (рН 6,6-8,1) или рН-метр

Стандартные растворы инсектицидов в этиловом спирте или ацетоне

Приборы и посуда

Гомогенизатор

Водяная баня

Ножницы

Стеклянные воронки

Круглодонные колбы на 25, 50, 100 и 1000 мл

Делительные воронки на 100 мл

Бюксы на 25 и 50 мл с пришлифованными крышками